食品微生物普通光学显微镜实训

1. 实验器材

普通光学显微镜、擦镜纸、标本片（细菌、放线菌、酵母菌、霉菌等）。

2. 实验试剂

二甲苯、香柏油。

3. 普通光学显微镜的使用方法

（1）观察前的准备

显微镜使用时要从镜箱中取用。取放时注意右手握持镜臂，左手托住镜座，使显微镜保持直立、平稳。切不可用一只手倾斜提携、防止摔落目镜、要轻取轻放，放置时注意镜臂朝向自己，距上方桌边沿5～10cm，镜检时姿势要端正。

（2）开启光源

打开电源开关，通过开关按钮调节光线强弱。

（3）放置载玻片标本

将待镜检的载玻片标本放置在载物台上，用玻片夹固定，移动标本正对通光孔中央。

（4）低倍镜观察

先转动粗准焦螺旋，用眼从侧面观望，使载物台快速上升，直到低倍物镜距标本0.5cm左右停止。接着用眼睛接近目镜观察，用手慢慢转动粗准焦螺旋，使载物台缓慢下降，直到视野内物像较清晰为止。然后改用细准焦螺旋，调节至物像清晰。最后前后左右轻移载玻片位置，在视野中找到要观察的部位。注意视野中的物像为倒像，移动载玻片时应向相反方向移动。

（5）高倍镜观察

先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到最清晰的程度，才能进行高倍镜的观察。旋转物镜转换器，使高倍物镜移到卡槽位置上，利用物镜镜头的等焦性微调细准焦螺旋，使物像清晰。再次移动载玻片标本找到欲观察的部位。

（6）油镜观察

油镜的工作距离很小，所以要防止载玻片和物镜上的透镜损坏。使用时，一般是经低倍、高倍到油镜。当高倍物镜对准标本后，再加油镜观察。载玻片标本也可以不经过低倍和高倍物镜，直接用油镜观察。显微镜有自动止降装置的，载玻片上加油以后，将油镜下移到油滴中，到停止下降为止，然后用微调向上调准焦点。没有自动止降装置的，对准焦点的方法是从显微镜的侧面观察，将油镜下移到与载玻片稍微接触为止，然后用微调向上提升调准焦点。调节至找到清晰图像，并绘制视野图像，标注样品名称和放大倍数。

（7）整理

显微镜使用结束后、下降载物台至最低处，取下载玻片标本，清洁显微镜。油镜镜头清洁要用三张擦镜纸。第一张擦镜纸拭去镜头上的香柏油，第二张擦镜纸蘸少许二甲苯擦拭镜头上残留的油迹，第三张擦镜纸擦去残留的二甲苯。另外，可用柔软的绸布擦拭显微镜的金属部件。把物镜转动呈“八”字形或置于最低倍物镜下，并调节玻片夹至适当位置，使物镜不会碰到。最后，套上专用防尘罩，并将显微镜放回指定位置。

4. 显微镜使用注意事项

（1）必须遵守操作规程，严格认真地按要求操作。取送显微镜时，应右手握住镜臂，左手拖住镜座，轻拿轻放。切勿用一只手斜提，前后摆动，防止目镜画出跌落。

（2）保护好镜头，揩拭目镜、物镜上的灰尘或污物，必须使用专用的擦镜纸。切勿用手指、手帕、纱布和普通纸擦。

（3）物镜镜头的切换一定要使用转换器，以免使镜头脱落和损坏。

（4）转动粗、细准焦螺旋时，不要用力过猛，以防止机件损伤，调节失灵。

（5）镜检时，坐姿端正，一般用左眼观察物象，用右眼看实验报告纸画图。两眼须同时睁开，以减少疲劳。

（6）载物台要保持清洁干燥，切勿上材料、水滴、试剂接触物镜和载物台。如沾上，应立即揩擦干净，避免镜头等被污染和腐蚀。

5. 显微镜的维护

显微镜是精密贵重的仪器，必须很好地维护。显微镜用完后要放回原来的镜箱或镜柜中，同时要注意下列事项：

（1）观察完后，先降下载物台，移去观察的载玻片标本。

（2）用过油镜的，应先用擦镜纸将镜头上的油擦去，再用擦镜纸蘸着二甲苯擦拭2～3次，最后再用擦镜纸将二甲苯拭去。

（3）转动物镜转换器，使镜头离开通光孔。

（4）将镜身下降到最低位置，调节好镜台上标本移动器的位置，罩上防尘套。

（5）镜头的保护最为重要。不要随意取下目镜，以防止尘土落入物镜。镜头要保持清洁，只能用软而没有短绒毛的擦镜纸擦拭。擦镜纸要放在纸盒中，以防沾染灰尘。切勿用手绢或纱布等擦拭镜头。物镜在必要时可以用溶剂清洗，但要注意防止溶解固定透镜的胶固剂。根据不同的胶固剂，可选用不同的溶剂，如酒精、丙酮和二甲苯等，其中最安全的是二甲苯。方法是用脱脂棉花团蘸取少量的二甲苯，轻擦，并立即用擦镜纸将二甲苯擦去，然后用洗耳球吹去可能残留的短绒。目镜是否清洁可以在显微镜下检视。转动目镜，如果视野中可以看到污点随着转动，则说明目镜已沾有污物，可用擦镜纸擦拭接目的透镜。如果还不能除去，再擦拭下面的透镜，擦过后用洗耳球将短绒吹去。在擦拭目镜或由于其他原因需要取下目镜时，都要用擦镜纸将镜筒的口盖好，以防灰尘进入镜筒内。